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121.
常规PCR与RACE结合法快速从cDNA文库中克隆基因 总被引:1,自引:0,他引:1
首先根据Fe(Ⅱ)-转运蛋白基因家族的保守区设计同源的常规PCR引物(F1,R1),扩增出490bp的特异片段。然后根据RACE法原理,巧妙地设计3′RACE(F2)和5′RACE(R3)特异性引物,使两者既能分别与文库载体上的筛选扩增引物配对扩增cDNA 3′和5′末端序列,又能使扩增出的3′RACE和5′RACE产物序列有重叠部分;另外设计引物时还兼顾到使F2和R3也能配对,从而能对3′RACE和5′RACE扩增产物进行双特异性引物常规PCR鉴定。该方案不但能够直接根据序列鉴定3′RACE和5′RACE产物是否为同一基因序列,还能快捷地用常规PCR鉴定3′RACE和5′RACE扩增产物是否为特异性扩增,避免了对非特异性扩增产物的克隆测序等繁琐的鉴定过程,优化了基因克隆策略。最后根据拼读出的全长序列设计引物(F4,R4)扩增出完整编码区。应用该方法成功地从小金海棠缺铁处理的根系cDNA文库中克隆了Fe(Ⅱ)-转运蛋白基因的cDNA。说明该方案是一种从cDNA文库中克隆目的基因的快捷优化方法。 相似文献
122.
缺铁逆境胁迫下水稻叶蛋白质组的双向电泳分析 总被引:12,自引:0,他引:12
水稻幼苗经缺铁胁迫诱导处理1、3、5d后,用酚法和TCA/丙酮法提取叶的可溶性蛋白,进行双向电泳(2-DE)分析.结果显示:(1)三种缺铁胁迫的可溶性蛋白,在不同的pH范围中2-DE图谱上的比较.使用pH3~10宽范围、线性(L)的IPG胶条,经电泳分离后利用Z3图象分析软件,可在SDS-PAGE凝胶上检测到450个左右的蛋白点,酸性蛋白占89%.选用pH4~7窄范围、线性(L)的IPG胶条,经电泳后可在SDS-PAGE凝胶上检测到600个左右的蛋白点,其中缺铁诱导上调表达的有29个点,减弱表达的有1个点,诱导特异表达的有5个点.(2)不同方法提取可溶性蛋白的差异.酚法提取的蛋白再溶性好,纯度较高.TCA/丙酮法简单易操作,蛋白损耗少,在2-DE图象上.碱性端显示的蛋白点较多,但此法的缺点是再溶性差,对2-DE成功分离蛋白有影响. 相似文献
123.
基于Hu不变矩扩展的交通标志识别 总被引:2,自引:0,他引:2
交通标志的识别是智能交通系统(ITS)的组成部分之一,具有十分重要的意义,对Hu提出的区域不变矩和Chen提出的区域不变矩快速算法进行了扩展,得到一组新的描述形状特征的参数,这些参数具有平移、缩放和旋转不变性,并且具有较低的计算复杂性,具有Hu和Chen方法的综合优点. 相似文献
124.
卫星构架结构固有频率特性的试验研究和优化设计 总被引:2,自引:0,他引:2
以某卫星构架结构为研究对象,在有限元分析和模态试验验证的基础上,建立合理的优化模型,采用序列二次规划法进行固有频率的优化分析,力求尽可能地降低构架结构的总质量,同时保持原有的模态特性基本不变.优化结果表明,减重效果显著,即星上结构部件的减重潜力以及优化设计在工程设计领域的应用具有现实意义. 相似文献
125.
根癌农杆菌介导苜蓿体胚转化及转基因植株再生 总被引:5,自引:0,他引:5
用含质粒载体pCAMBIA2301(带有受CaMV35S启动子调控的GUS基因和nptⅡ基因)的根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens转化晋南苜蓿Medicago sativa L.cv.Jinnan的体胚组织,发现负压处理有利于提高转化频率(可达35%),3批共158个体胚切块的转化实验共获得具有卡那霉素抗性的再生植株15株,经组织化学染色和分子检测,证实GUS基因已整合到转化植株基因组中,在芽、叶片、叶柄和根等组织中均有表达,并在土壤栽培过程中保持稳定的表达. 相似文献
126.
127.
壬基酚对鲫鱼(Carassius auratus)巨噬细胞的免疫毒性 总被引:3,自引:1,他引:3
从鲫鱼(Carassius auratus)头肾中分离巨噬细胞,体外暴露雌二醇和壬基酚后,用MTT法测定它们对鲫鱼巨噬细胞增殖的影响,用化学发光法测定它们对鲫鱼巨噬细胞呼吸爆发的影响,评价壬基酚的免疫毒性,并与天然激素雌二醇的免疫效应相比较.结果表明,雌二醇对鲫鱼巨噬细胞的增殖有明显的诱导作用,壬基酚对鲫鱼巨噬细胞增殖在低浓度表现为诱导作用,高浓度表现为抑制作用.雌二醇、壬基酚对鲫鱼巨噬细胞呼吸爆发有明显的诱导作用.研究结果表明壬基酚对鲫鱼具有潜在的免疫毒性.与天然激素雌二醇的免疫作用效应比较,进一步证明了壬基酚的弱雌激素活性. 相似文献
128.
蓄能型太阳能溶液除湿蒸发冷却空调系统研究 总被引:11,自引:0,他引:11
以实验的方法对采用填料塔式再生器的溶液除湿蒸发冷却空调系统的再生性能进行研究,得出了再生器热源温度在55.5 ℃工况下的传质系数和热源温度对出口参数有影响的结论.同时发现传质系数平均值约为0.32 mg/(m2·Pa·s),根据实验数据提出提高填料塔式再生器再生性能的方法.同时提出一种蓄能密度高的相变潜能蓄能模式,并在理论上对其进行定量分析,结果表明该种蓄能模式的蓄能密度一般在1 000 MJ/m3以上,这表明该蓄能方法比常规蓄能方法更为有效. 相似文献
129.
基于粒子追踪的风场可视化方法 总被引:1,自引:0,他引:1
为了更直观地表示三维风场的变化特点,针对气象风场数据集的特点采用粒子系统的方法可视化表示风场属性,提出了通过粒子的位置变化动态反映风场速度方向以及大小,同时将风场涡旋度的强弱映射成粒子本身的旋转状态,最后选取CDC数据中心的风场数据验证了实验结果。 相似文献
130.
殷新红 《江西科技师范学院学报》2005,(6):102-104
优秀的教研期刊应具备学术性、导向性、实用性和可读性。编辑在审稿过程中必须要坚持学术性原则、导向性原则、实用性原则和可读性原则,并且在实施过程中注重选题的新颖、内容的创新、格式的规范。从而保证刊物的质量。使其获得良好的社会效益。 相似文献